5-Бромо-4-хлоро-3-индолил-бета-D-глюкуронид циклохексиламониева сол CAS:18656-96-7

Ефектът на 5-бромо-4-хлоро-3-индолил-бета-D-глюкуронид циклохексиламониевата сол (X-глюкуронид) е способността му да произвежда синя утайка или промяна на цвета в присъствието на ензима бета-D-глюкуронидаза. Тази ензимна реакция протича, когато гликозидната връзка между индоловата група и глюкуроновата киселинна част се разцепи от бета-D-глюкуронидаза.

Приложението на X-глюкуронид е предимно в експериментите по молекулярна биология и ензимология. Той обикновено се използва като субстрат за откриване на активността на бета-D-глюкуронидаза. Някои специфични приложения включват:

Анализи на репортерни гени: X-глюкуронидът често се използва като субстрат в анализи на репортерни гени, където бета-D-глюкуронидазата се използва като репортерен ензим. Чрез сливане на промоторния регион или кодиращата последователност на ген от интерес с гена на бета-D-глюкуронидазата, изследователите могат да измерят експресията или активността на гена, като наблюдават образуването на синя утайка или промяната на цвета, когато се добави X-глюкуронид.

Тестове за трансформация на бактерии и дрожди: X-глюкуронидът може да се използва за откриване на успешна трансформация на бактерии или дрожди с вектор, съдържащ гена бета-D-глюкуронидаза. Трансформираните клетки, експресиращи ензима, могат да хидролизират X-глюкуронид, което води до видима промяна в цвета или утайка.

Хистохимично оцветяване: X-глюкуронидът се използва в техники за хистохимично оцветяване за визуализиране на наличието и разпределението на бета-D-глюкуронидазната активност в тъкани или клетки. Това оцветяване позволява локализирането и идентифицирането на клетки, експресиращи ензима.