Фенилгалактозид CAS:2818-58-8

Ефект върху ензимната активност: Фенилгалактозидът обикновено се използва за измерване на активността на ензима β-галактозидаза.Когато фенилгалактозидът се хидролизира от β-галактозидаза, той освобождава р-нитрофенол.Натрупването на р-нитрофенол може да бъде количествено измерено, което дава представа за активността на β-галактозидазата.Този ефект се използва в приложения като ензимни анализи и системи за скрининг.

Анализ на генната експресия: Фенилгалактозидът често се използва като субстрат в експерименти по молекулярна биология за изследване на генната експресия.Генът lacZ, който кодира β-галактозидаза, обикновено се слива с регулаторни последователности на други интересни гени.Експресията на гена lacZ и хидролизата на фенилгалактозид от β-галактозидаза може да покаже модела на експресия и нивото на изследвания целеви ген.

Системи за скрининг: Фенилгалактозидът е важен компонент на системите за скрининг, които използват β-галактозидазната активност.Един широко известен пример е методът за синьо-бял скрининг, който се използва за идентифициране на рекомбинантни или трансформирани клетки в експерименти с молекулярна биология.Колониите, които успешно са поели рекомбинантната ДНК или са претърпели генетична рекомбинация, ще експресират β-галактозидаза, което води до хидролиза на фенилгалактозид и образуване на син цвят.

Пречистване на протеини: В някои случаи фенилгалактозидът може да се използва като лиганд за афинитетна хроматография за пречистване на протеини, които специфично се свързват или се активират от β-галактозидаза.Протеинът, който представлява интерес, може да има афинитетен маркер или слят маркер, съдържащ β-галактозидаза-свързващ домен.Чрез преминаване на протеиновата смес през колона с имобилизиран фенилгалактозид, желаният протеин може да бъде селективно задържан и впоследствие елуиран.