IPTG CAS:367-93-1 Цена на производител
Изопропил β-D-1-тиогалактопиранозид (IPTG) е синтетичен аналог на лактозата, който обикновено се използва в изследванията на молекулярната биология и биотехнологичните приложения.IPTG се използва предимно за индуциране на експресията на гени в бактериални системи, където служи като молекулярен тригер за иницииране на транскрипцията на целевите гени.
Когато се добави към растежната среда, IPTG се поема от бактериите и може да се свърже с lac репресорния протеин, предотвратявайки блокирането на активността на lac оперона.Лак оперонът е клъстер от гени, участващи в метаболизма на лактозата, и когато репресорният протеин се отстрани, гените се експресират.
IPTG често се използва във връзка с lacUV5 мутантния промотор, който е конститутивно активна версия на lac промотора.Чрез комбиниране на индукция на IPTG с този мутантен промотор, изследователите могат да постигнат високи нива на генна експресия.Това позволява производството на големи количества протеин за пречистване или други приложения надолу по веригата.
В допълнение към генната експресия, IPTG също често се използва в синьо/бели скринингови анализи.При тази техника генът lacZ обикновено се слива с интересен ген и бактериите, които успешно експресират този слят ген, ще произведат активен ензим β-галактозидаза.Когато се добави IPTG заедно с хромогенен субстрат като X-gal, бактериите, които експресират слетия ген, стават сини поради активността на β-галактозидазата.Това дава възможност за идентифициране и селекция на рекомбинантни щамове, които успешно са интегрирали интересния ген.
Индуциране на генна експресия: IPTG обикновено се използва за индуциране на експресията на целеви гени в бактериални системи.Той имитира естествения индуктор лактоза и се свързва с lac репресорния протеин, като го предпазва от блокиране на lac оперона.Това позволява транскрипцията и експресията на желаните гени.
Експресия и пречистване на протеини: IPTG индукцията често се използва за получаване на големи количества рекомбинантни протеини за различни цели, като биохимични изследвания, терапевтично производство или структурен анализ.Чрез използване на подходящи експресионни вектори и индукция на IPTG, изследователите могат да постигнат високи нива на производство на целеви протеини в бактериални гостоприемници.
Синьо/бял скрининг: IPTG често се използва в комбинация с lacZ гена и хромогенен субстрат, като X-gal, за синьо/бели скринингови анализи.Генът lacZ обикновено се слива с гена, който представлява интерес, и бактериите, които успешно експресират този слят ген, ще произведат активен ензим β-галактозидаза.Когато се добавят IPTG и хромогенният субстрат, рекомбинантните щамове, експресиращи слетия ген, стават сини, което позволява лесно идентифициране и селекция.
Изследване на генната регулация: Индукцията на IPTG обикновено се използва в изследванията за изследване на регулацията на гени и оперони, особено lac оперона.Чрез манипулиране на концентрациите на IPTG и наблюдение на експресията на компоненти на lac оперон, изследователите могат да изследват механизмите на генна регулация и ролята на различни фактори или мутации.
Системи за генна експресия: IPTG е решаващ компонент в няколко системи за генна експресия, като системите, базирани на Т7 промотор.В тези системи, lac промоторът често се използва за стимулиране на експресията на Т7 РНК полимераза, която от своя страна транскрибира целеви гени под контрола на Т7 промоторни последователности.IPTG се използва за индуциране на експресията на Т7 РНК полимераза, което води до активиране на експресията на целевия ген.
Състав | C9H18O5S |
Анализ | 99% |
Външен вид | Бяла пудра |
CAS номер | 367-93-1 |
Опаковане | Малки и насипни |
Срок на годност | 2 години |
Съхранение | Съхранявайте на хладно и сухо място |
Сертификация | ISO. |